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微生物沉降涂抹作业指导书

来源:食品论坛作者:287856354网址:http://bbs.foodmate.net/thread-1251457-1-1.html浏览数:19 
文章附图
微生物沉降涂抹作业指导书
1 参考标准:
GBT 16294-2010 医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法
GB 15979-2002 一次性使用卫生用品卫生标准
2 涂抹操作(菌落总数、大肠菌群):
2.1配制药品:生理盐水(试管中+棉签)或直接采购无菌涂抹棒、PCAVRBA
2.2培养基灭菌:PCA------12115分钟;VRBA------无需灭菌,煮沸即可,生理盐水------12115分钟
注:灭菌后的生理盐水需冷却彻底后才可以进行涂抹操作
2.3涂抹操作:
2.3.1取待测物(人员手部、操作案板、工器具表面等)涂抹面积为5*5cm2
2.3.2涂抹后将与手部接触的棉签棒的部分折掉;
2.3.3检样作出2~3个稀释度:
1mL(原液)
无菌平皿中(10-1),2板菌落,2板大肠=4
9mL灭菌生理盐水中(10-2),2板菌落,2板大肠=4
10-2试管中吸取1mL,加入9mL灭菌生理盐水中(10-3),2板菌落,2板大肠=4
注:菌落倒入配置后灭菌的PCA15~20mL,大肠倒入配制后灭菌的VRBA15~20mL
2.3.4培养:待琼脂凝固后放入培养箱中,平皿倒置(除霉菌PDA外,其余平皿均倒置培养),36±1℃,大肠培养24小时,菌落培养48小时。
2.3.5查板计数:于N+1天,查大肠结果,N+2天,查菌落结果。
3沉降菌(菌落总数、霉菌)
3.1配制培养基:PCAPDA
3.2倒板:按照计划沉降点数,计算所需培养基及倒板的数量,PCA20mL/板,PDA不得少于20mL/板(培养时间长,琼脂少就干巴了);
3.3沉降:车间在30m2以上者,于东、西、南、北(距墙1m处)、中五点;小于30m2者,于一条对角线里、中、外三点,高度均在1.5m处采样,打开平皿盖,使平板在空气中暴露5 min(操作时,周围不得有人员走动,防止结果不准);
3.4收板:将手部用75%酒精消毒后再收板,切忌触碰到平板内琼脂
3.5培养:PCA,36±1,培养48小时 DA,28,培养5天;
3.6查板计数:于N+2天,查菌落结果,N+5天,查霉菌结果。


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